技術(shù)文獻(xiàn)
技術(shù)文獻(xiàn)
細(xì)胞全能性原理:植物細(xì)胞具有發(fā)育成完整個體的潛能,這是技術(shù)實(shí)施的理論核心。離體后的細(xì)胞在特定條件下可脫分化為愈傷組織,進(jìn)而再分化形成完整植株植物細(xì)胞組織培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)原理。
植物細(xì)胞組織培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)原理
一、理論基礎(chǔ)
?細(xì)胞全能性?
植物細(xì)胞含有全套遺傳信息,在離體條件下通過脫分化形成愈傷組織,再經(jīng)再分化形成完整植株?。這一特性是組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ),其表達(dá)難易程度為:受精卵>生殖細(xì)胞>干細(xì)胞>體細(xì)胞?。
?代謝調(diào)控機(jī)制?
通過激素(如生長素和細(xì)胞分裂素)調(diào)控細(xì)胞分裂與分化,例如生長素/細(xì)胞分裂素比例決定愈傷組織形成或器官發(fā)生?。
二、關(guān)鍵技術(shù)流程
?外植體選擇與消毒?
選取健康組織(如莖尖、葉片)作為外植體,經(jīng)酒精、次氯酸鈉等消毒處理以去除微生物污染?。
?培養(yǎng)基配制?
需包含無機(jī)鹽、碳源、維生素及植物激素,pH值通常調(diào)節(jié)至5.6-5.8?。MS培養(yǎng)基是常用基礎(chǔ)配方?。
?培養(yǎng)條件控制?
?溫度?:多數(shù)植物適宜25±2℃?。
?光照?:再分化階段需光照(12-16小時/天),脫分化階段可暗培養(yǎng)?。
?濕度?:維持90%以上相對濕度?。
?脫分化與再分化?
?脫分化?:外植體在激素誘導(dǎo)下形成無定形愈傷組織?。
?再分化?:調(diào)整激素比例誘導(dǎo)愈傷組織形成胚狀體或器官原基?。
